斷奶是仔豬生長發(fā)育過程中的關(guān)鍵時期,處于此階段的仔豬一方面要面對著自身消化器官發(fā)育不完全等問題,另一方面要面對外界環(huán)境及飼料的巨大變化,這些刺激可能會讓仔豬出現(xiàn)短暫性厭食、腸道炎癥以及腸道菌群失調(diào)等情況,導(dǎo)致仔豬斷奶腹瀉的發(fā)生。而在此階段,產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)是引發(fā)仔豬斷奶腹瀉的主要病原微生物之一,其會通過在斷奶仔豬腸道中大量增殖打破仔豬腸道菌群平衡誘發(fā)仔豬繼發(fā)性感染,同時ETEC分泌的熱不穩(wěn)定毒素和熱穩(wěn)定毒素會進(jìn)一步破壞腸上皮細(xì)胞滲透壓平衡,加劇機(jī)體腸道屏障功能損傷,引起仔豬出現(xiàn)分泌性腹瀉癥狀并影響生長性能。為了預(yù)防仔豬斷奶后腹瀉,生產(chǎn)上常會在日糧中添加抗生素或高劑量的氧化鋅,然而飼料中添加抗生素及氧化鋅可能會引起耐藥性增加、藥物殘留以及環(huán)境中礦物質(zhì)積累過量等問題。因此,需要找到能緩解斷奶仔豬腹瀉的抗生素或氧化鋅的替代品。已有較多的研究表明LPL能夠起到提高動物消化率,改善動物機(jī)體健康,促進(jìn)動物生長的作用。然而,LPL是否可以在仔豬感染致病菌的條件下,發(fā)揮其改善動物機(jī)體健康的作用還需要進(jìn)一步的研究。基于此,本試驗(yàn)以斷奶仔豬為試驗(yàn)動物,在仔豬日常飼糧中添加LPL,研究在正常飼養(yǎng)條件LPL對仔豬生長性能及腹瀉情況的影響。同時,構(gòu)建ETEC攻毒仔豬模型,在此基礎(chǔ)上考察LPL對ETEC感染仔豬生長性能、免疫功能及腸道健康的影響,以期為營養(yǎng)改善斷奶仔豬腹瀉問題提供參考資料。
試驗(yàn)技術(shù)設(shè)計(jì)
本試驗(yàn)通過在斷奶仔豬飼糧中添加溶血磷脂(Lysophospholipid,LPL),研究其在正常飼養(yǎng)條件下對斷奶仔豬生長性能的影響,以及在感染產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(Enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC)條件下對仔豬生長性能、免疫功能和腸道健康的影響。本次試驗(yàn)選取32頭體重相近的健康25日齡DLY斷奶仔豬(7.24±0.07kg),根據(jù)體重相近原則,將斷奶仔豬隨機(jī)分為 4 個處理,分別為CON組(基礎(chǔ)飼糧)、CON+ETEC組(ETEC,基礎(chǔ)飼糧)、LPL 組(基礎(chǔ)飼糧+0.3%LPL)、ETEC+LPL組(基礎(chǔ)飼糧+0.3%LPL,ETEC),每個處理8個重復(fù),每個重復(fù)1頭斷奶仔豬,進(jìn)行單籠飼養(yǎng)。正式試驗(yàn)期為21d,試驗(yàn)第19d,CON+ETEC組、LPL+ETEC組每只斷奶仔豬灌胃400mLETEC菌液,CON組和LPL組每只斷奶仔豬灌胃等量生理鹽水。于試驗(yàn)第22天早晨,所有斷奶仔豬麻醉后屠宰采樣。
試驗(yàn)結(jié)果
正常飼養(yǎng)階段(1-18d):
(1)與對照組相比,飼糧中添加LPL對斷奶仔豬ADG、ADFI以及F/G未產(chǎn)生顯著影響(P>0.05),但顯著降低了仔豬腹瀉率以及腹瀉指數(shù)(P<0.05)。
(2)與對照組相比,添加LPL的處理組中斷奶仔豬的DM、EE、GE、CP及Ash的表觀消化率顯著提高(P<0.05)。
ETEC攻毒階段(19-21d):
(1)ETEC攻毒使兩個攻毒組斷奶仔豬的腹瀉指標(biāo)顯著上升(P<0.05),但添加LPL可顯著緩解ETEC攻毒造成的腹瀉率和腹瀉指數(shù)上升(P<0.05)。
(2)與CON組和CON+LPL組比,ETEC感染的斷奶仔豬盲腸食糜中大腸桿菌數(shù)量顯著上升(P<0.05);LPL添加可以顯著增加盲腸食糜中芽孢桿菌數(shù)量(P<0.05),同時可顯著改善由于ETEC感染導(dǎo)致的盲腸食糜中乳酸桿菌和芽孢桿菌數(shù)量下降(P<0.05)。
(3)ETEC攻毒顯著增加斷奶仔豬血清中TP的含量(P<0.05),有提高GLB和ALB含量的趨勢(0.05<P<0.10)。飼糧添加LPL可顯著降低斷奶仔豬血清中TG和AST的含量(P<0.05)。
(4)ETEC攻毒會破壞斷奶仔豬腸道形態(tài),使小腸絨毛高度顯著下降、顯著加深腸道隱窩深度并降低腸道絨隱比(P<0.05),但添加LPL可有效緩解腸道形態(tài)損傷。
(5)ETEC攻毒會顯著降低血清中T-AOC活性(P<0.05),顯著增加MDA含量(P<0.05),但添加LPL可明顯降低ETEC感染仔豬血清中的MDA水平(<0.05)。添LPL可顯著增加回腸SOD的活性以GSH-Px的活性(P<0.05)。
(6)ETEC攻毒會顯著增加血清中IL-1β和IL-10的含量(P<0.05),同時添加LPL可顯著降低血清中IL-1β和IL-6的含量(P<0.05)。ETEC攻毒會顯著增加回腸中IL-6的含量(P<0.05),以及有增加回腸中IL-1β含量的趨勢(0.05<P<0.10)。同時添加LPL可顯著降低空腸中IL-6的含量(P<0.05),有降低空腸中TNF-α含量的趨勢(0.05<P<0.10)。
(7)ETEC攻毒會顯著下調(diào)空腸中MUC2基因表達(dá)水平(P<0.05),顯著上調(diào)空腸及回腸中CFTR的基因表達(dá)水平(P<0.05)。添加LPL可顯著上調(diào)十二指腸中MUC1、Occludin及LPA5基因的表達(dá)水平(P<0.05),顯著上調(diào)空腸中Occludin、LPA2及LPA5基因的表達(dá)水平(P<0.05),顯著上調(diào)回腸中MUC1、ZO-1、LPA2基因的表達(dá)水平(P<0.05),同時有下調(diào)CFTR基因表達(dá)水平的趨勢(0.05<P<0.10)。
綜上所述,在正常飼養(yǎng)條件下,斷奶仔豬飼糧中添LPL能緩解腹瀉癥狀并能顯著提高仔豬的養(yǎng)分表觀消化率。ETEC攻毒會造成斷奶仔豬腸道健康受損腹瀉率增加,同時降低抗氧化能力及免疫功能。斷奶仔豬飼糧中添LPL可以善腸道組織形態(tài)、增加盲腸中有益菌數(shù)量、抑CFTR基因的表達(dá)、增強(qiáng)機(jī)體氧化能力來緩ETEC感染造成的斷奶仔豬腹瀉。
原文:杜雯婷.溶血磷脂對大腸桿菌感染仔豬生長性能、免疫功能和腸道健康的影響[D].四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2024.DOI:10.27345/d.cnki.gsnyu.2024.000324.
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